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细胞克隆实验
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应用简介
       克隆形成及细胞克隆接种存活率,通过观察单细胞集落形成情况,来计算克隆形成率,了解其增殖能力。
技术原理
       单个细胞在体外持续增殖6代以上时细胞数量已达60个左右,此细胞群体成为克隆或集落,大小在1.0-2.0mm之间。集落形成率表示细胞的独立生存能力,各种理化因素可能导致细胞的克隆形成能力发生改变,通过计数克隆形成率,可对单个细胞的增殖潜力做定量分析,了解细胞的增殖率和对生存环境的适应性。软琼脂培养或平板克隆是最常用的方法。
实验方法

技术总结
       1、试验成功的关键是细胞悬液的制备和接种密度。细胞一定要分散得好,不能有细胞团,接种密度不能过大。
       2、细胞在进行克隆形成实验时要求有95%以上的分散度,否则结果的准确度会受到很大影响。
       3、克隆形成率公式:克隆形成率=(克隆数/接种细胞数)×100%,细胞克隆形成率即细胞接种存活率,表示接种细胞后贴壁的细胞成活并形成克隆的数量。
       4、一般初代培养细胞克隆形成率弱,传代细胞系强;二倍体细胞克隆形成率弱,转化细胞系强;正常细胞克隆形成率弱,肿瘤细胞强。