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动物细胞培养技术
时间:2023-01-22 17:23:24点击量:10次


一、动物细胞培养的基本概念

细胞培养是通过无菌操作将细胞从动物体内分离出来,置于模拟动物体内生理条件的人工环境中,进行体外培养,使其继续生长的过程。通过这项技术,人们可以观察细胞生长、繁殖、细胞分化和细胞衰老等生命现象。动物培养物的培养物可以是单个细胞或一组细胞。

二、动物细胞培养和分型

根据体外培养的细胞在培养皿中是否贴壁,可分为贴壁型和悬浮型。

(A)粘在墙上

培养的细胞需要在支架上生长,大部分属于这种类型。贴壁生长后,分化变得不明显,容易失去原有的细胞组织特征。形态表现简单,体内部分原有特征丧失,在胚层体现其起源。在判断细胞形态时,不能根据体内组织学标准进行判断,只能大致分为以下几种:

1.成纤维细胞:(成纤维细胞)

2.上皮细胞类型

3.游走细胞型

4.多态细胞类型

三、培养细胞的寿命

指细胞在培养过程中持续增殖生长的时间。在培养系统中,单个细胞表现出很大的独立性。然而,有活力的细胞必须通过细胞周期繁殖并繁殖成菌落。集落细胞是培养细胞的基本存在形式,它们在形态和功能上相互依赖。

单细胞生长周期(细胞周期):

体外培养细胞的生长过程一般分为三个阶段:

1)原代培养期(约1 ~ 4周)

细胞运动活跃,但分裂不旺盛,多为二倍体核型。原代细胞的形态、结构和功能活性与体内原始组织基本相似。每个细胞的遗传性状互不相关,细胞之间高度相互依赖。如果将细胞稀释分散成单细胞,在软琼脂培养基中培养,细胞克隆形成率会下降,说明细胞的独立生存能力差。

2)通过期

细胞增殖旺盛,保持二倍体核型,也叫二倍体细胞系。为了保存二倍体细胞的特性,细胞应在第一代或早期传代中冷冻。传代可以重复几天到一周,持续几个月,这是一个细胞系,通常是有限细胞系。

3)衰退期

细胞还在生长,增殖缓慢,不增殖,然后凋亡下降。

注:在某些因素的影响下,处于三个阶段中任何一个阶段(一般发生在传代后期或衰退阶段)的细胞,

如血清质量差、病毒污染、温度和pH值不稳定等。,细胞可能会经历自发的转化。

细胞可能获得永生。获得细胞持久的增殖能力,这样的细胞群体称为连续细胞系。但细胞永生后,核型大多变为非整倍体,接触抑制消失。到目前为止,国际上和国内已经建立了许多细胞系,其中大部分来自肿瘤细胞。

四、细胞培养的应用

细胞培养技术已广泛应用于生物学的各个领域。

1.基础科学研究

(1)细胞生物学

(2)基因功能学科

(3)遗传学

2.药物研发

(1)新药筛选:如化学合成药物的药效研究、中药有效成分的筛选和鉴定等。

(2)疫苗研发:如病毒性疫苗(肝炎病毒疫苗、艾滋病疫苗等)的研发。)和肿瘤疫苗(多肽疫苗)。

(3)基因工程药物生产:如一些临床治疗用细胞生长因子(干扰素)的研发和应用。

(4)细胞工程药物生产:生物活性肽的研发,人参皂苷、紫杉醇等生物活性成分的研发。

(5)单克隆抗体的制备:包括诊断用单克隆抗体和治疗用单克隆抗体。

目前,动物细胞生产的各种疫苗、单克隆抗体和干扰素已经占据了大部分市场。随着细胞培养技术的发展,将会有更多具有医学价值的生物制品问世,造福人类。

文章出自:动物实验外包     想了解更多请关注:http://www.do-gene.cn/