细胞划痕实验和Transwell实验,究竟有什么区别?简单举个例子来说明吧,假设我们研究某药物对肿瘤细胞行为的影响,那么划痕实验和Transwell实验就是我们最常用到的两种方式!
transwell和划痕有什么区别,其最大的区别就是实验原理不同!
划痕实验可以研究肿瘤细胞在经过药物处理后的迁移能力。前面有说到transwell和划痕有什么区别,其最大的区别就是实验原理不同!其中划痕实验的基本原理就是:在融合的单层细胞上我们给划拉出一个口子,创造出一个空白的地方出来,可以用微量枪头或其它硬物划线,后面划痕边缘的细胞会逐渐进入空白区域,这时候我们可以在细胞迁移过程中捕获图像,通过测量不同时间点的划痕间距并计算差值,可对细胞的迁移能力做出判断。
划痕实验中,细胞状态越好成功的可能性也越大。但需要注意的是密度大小直接决定实验的成功,在对药物处理完肿瘤细胞后,细胞再次铺板时,细胞的铺板密度及状态一定要注意,建议在细胞长到80-90%后再对细胞进行划痕。
而Transwell实验,则是可以研究肿瘤细胞经过药物处理后的侵袭能力。transwell和划痕有什么区别中的Transwell实验,其基本原理是将transwell小室放入培养板中,小室内称为上室,培养板内称为下室,上下层培养液以聚碳酸酯膜相隔,上室内添加上层培养液,下室内添加下层培养液。将细胞种在上室内,由于膜有通透性,下层培养液中的成分可以影响到上室内的细胞,从而可以研究下层培养液中的成分对细胞生长、运动等的影响。
也需要注意的是,小室中铺基质胶的浓度和温度也要把控好,基质胶凝固很容易,在负20℃和室温下可能发生凝固。其次,小室膜的孔径也要注意,太大太小都会直接影响实验的成功率,一般的细胞选用8μm孔径的就可以,癌细胞等可以选用5μm孔径,白细胞或淋巴细胞迁移则可选择3μm孔径的。
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