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提 RNA 的痛,只有科研狗才懂
时间:2026-04-22 08:40:27点击量:2次
提RNA很烦,不管我用试剂盒还是Trizol,每次手提RNA都要花很长时间。
因为担心沾到有毒的试剂,吸入有毒的气体,所以操作时就得特别小心,干活时间就变长了。
口罩全程得戴,尽量做个哑巴,最好找个夜晚没人的时候来提,不然RNase到处飞。
手套还得特别留神,破个洞,碰到Trizol或氯仿就"芜湖"了。
你以为提好就完事了吗,诶,不是的。要马上去测个纯度和浓度,赶紧把逆转录给做了,qPCR什么的等第二天吧,太困了。
我的极限是每次提20来个样本,再多就肯定乱。一会儿这个buffer没加,一会儿那个管忘记关盖。
这里给大家一些建议啊,在保证实验安全的前提下,再考虑把实验做好:
1 个人防护: • 手套全程戴,手套末端套住实验服袖口,皮肤别外露; • 戴护目镜,万一液体飞溅,可以保护眼睛,实验室没有就某宝某东买一副,20元上下。
2 识别风险: • 裂解液,不管试剂盒还是Trizol的,都是有毒的,腐蚀皮肤和黏膜; • 氯仿,Trizol提取时要用到,但现在几乎买不到了,都用替代物,但毒性未知,也要小心; • β-巯基乙醇,试剂盒提取时会用到,很臭,要在通风橱里打开。
3 提高质量: • 提前一天备好全部耗材(要无RNase那种); • 开始做之前,把离心机提前预冷; • 样本不要一个一个做到底,所有样本完成同一个步骤后,检查一遍,没问题就进入下一步; • 等离心的时间,去准备下一步,比如给离心管标记、提前准备好下一步的试剂; • 正确认识自己的极限,有的人可以一天干几百个样,但不是每个人都可以,分批做,保证质量比尽快做完更重要。
有条件(钱)的实验室,去整一台提取仪回来,可以省很多时间。
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