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动物实验外包——缺血性脑卒中模型
时间:2026-07-20 08:33:57点击量:6次



脑卒中根据其发生的机制不同,大致可以分为缺血性脑卒中出血性脑卒中两类。在所有的卒中病例中,大约87%属于缺血性脑卒中[1]。因而,缺血性脑卒中一直是科学研究中的一个重要课题。想要很好的开展缺血性脑卒中研究,稳定可靠的动物模型则必不可少。

脑缺血模型普遍采用国际上广泛认可的大脑中动脉栓塞模型Middle Cerebral Artery Occlusion,MCAO),其发病机理与人类缺血性脑卒中表现相似,对于制作模拟人脑缺血模型对脑缺血发病机制及药物筛选有重要意义[2]。目前使用度较高的两个造模方法是线栓法光化学法

线栓法[3]

实验动物:SD大鼠

造模方法:先分离并结扎 颈外动脉,同时暂时性结扎颈总动脉,将颈内动脉进行分离,剪断颈外动脉,从颈外动脉靠结扎线的远端做切口,插入尼龙线使其经过颈总动脉分叉进入颈内动脉,至有轻微阻力为止,阻断邻近的大脑中动脉所有血供。40-60min后缓缓拔出栓线。


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图1 线栓法操作示意图[4]

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图2 线栓法造模前后脑部散斑多普勒图 


从图2中可以明显看到插入线栓后大脑局部血流信后缺失(b,c),抽出线栓后可以看到脑部血流再灌注,脑部血流信号恢复(d)。

光化学法[5]

实验动物:SD大鼠

造模方法:选定照射部位,充分暴露颅骨,大鼠尾静脉注射玫瑰红 B,用相应光源进行照射;部位 大小可按照需要调整,一般选在皮质功能区如运动感觉区,以利于评定观察。

模型评估

1. mNSS评分[6]

国际标准目前定义正常SD大鼠为0分,mNSS评分在1-6分之间为轻度损伤,7-12分之间为中度损伤,13-18分之间为重度损伤。

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图3 造模后mNSS评分


2. 圆筒实验

记录大鼠左侧前肢、右侧前肢和双侧同时碰壁的次数。MCAO造模后使用脑对侧肢体的频率会明显下降,通过评估损伤肢体的使用频率可以判断大鼠的恢复状况。


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图4 造模后圆筒实验评分



3. Catwalk步态检测

catwalk 步态分析仪使用高速摄像头记录鼠的掌印面积、掌印压力数据。造模后的鼠掌印面积和掌印压力均会降低。


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图5 造模后掌印压力数据

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图6 造模后掌印面积数据



小结:

线栓法和光化学法在造模效果上各有优劣,在实际研究中需要根据自己的实验需求具体选择合适的方法。

参考文献:

[1] PAUL S, CANDELARIO-JALIL E. Emerging neuroprotective strategies for the treatment of ischemic stroke: an overview of clinical and preclinical studies[J]. Exp Neurol, 2021, 335: 113518.

[2]于洋, 朱雨岚 . 缺血性脑卒中后血管生成研究的进展[J]. 心血管 康复医学杂志 , 2021, 30(1): 99-102.

[3] LONGA E Z, WEINSTEIN P R, CARLSON S, et al. Reversible middle cerebral artery occlusion without craniectomy in rats [J]. Stroke, 1989, 20(1):84-91.

[4] 杨国源、金坤林、张志君,《实验卒中模型方法学》,上海交通大学出版社,2019年11月1日。

[5] WATSON B D, DIETRICH W D, BUSTO R, et al. Induction of reproducible brain infarction by photochemically initiated thrombosis[J]. Ann Neurol, 1985, 17(5): 497-504.

[6] 王晋晨, 熊晓星 . 缺血性脑卒中动物模型研究进展[J]. 医学综述, 2020, 26(10): 1881-1886, 1892.


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