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如何鉴定正在培养的细胞有无污染?
时间:2026-10-12 08:36:39点击量:2次


先来个小问题:细胞被污染还能洗洗重新用吗?

扔掉吧!!!

一般处理细菌污染的重要原则是——无限地稀释细菌的浓度,无限地减少细菌的数量。

当然如果你的细胞仍有富余或者冻存的,还是建议你把污染的扔掉,再复苏新细胞,以免影响实验数据,干扰判断。

那么如何鉴定正在培养的细胞有无污染?


第一步、看细胞,用肉眼观察

1、先看细胞瓶身,如果瓶身上没有裂缝,正常;如果瓶身上有裂缝,污染几率非常大。

2、再看培养基颜色,如果培养基颜色是红色或者粉色,正常;如果是橙色,则可能是污染或者细胞过密;如果是黄色,则污染几率非常非常大。

3、最后,如果培养基澄清,正常;如果有少许漂浮物,则可能是污染或者有细胞凋亡;如果培养基很浑浊,甚至出现絮状物,则污染几率非常大。

第二步、静置细胞 1~2 h,使用显微镜观察。

菌类污染通常分为杆菌、球菌和霉菌,下图是典型污染的细胞照片,希望能帮助大家判断。

1.png

以上污染菌类为杆菌,常见的有大肠杆菌, 2-5 μm 左右



2.png

以上污染菌类为球菌常见的有葡萄球菌,直径通常在 1~2 μm 左右



3.png


以上污染菌类为霉菌常见的有毛霉,菌丝宽 2~10μm左右


需要提醒的是,因为运输过程中细胞离开了其正常生长所需要的环境,部分细胞会出现凋亡或产生细胞碎片,容易误认为是细菌污染。

另外培养基中的杂质纤维也容易误认为是霉菌污染,具体区分方法如下:

1)细胞碎片&杆菌

细胞碎片只会随着细胞状态的变差而变多,通常增长不快;杆菌则增殖非常快,以常见的大肠杆菌为例,常温25℃增殖1倍需要40min左右(此数据可查阅相关文献验证),培养基很快变黄且浑浊。

2)凋亡细胞&球菌

凋亡细胞通常只比正常细胞小一点,只会随着细胞状态的变差而变多,通常增长不快;球菌则要小很多,且成串或成团,培养基很快变黄且浑浊。


3)杂质纤维&霉菌

杂质纤维通常是过滤时残留的滤纸纤维,或者是酒精棉球上的棉纤维,在不开瓶处理的情况下其数量不会增长;霉菌的话虽然增殖速度没有杆菌和球菌快,但还是会有明显增殖。


以上就是鉴定细胞有无污染的常用方法,希望大家的细胞都很少出现污染呢!


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