糖尿病已经成为严重危害人类健康的公共卫生问题。糖尿病及其并发症不仅严重影响糖尿病患者的生活质量，也是导致残疾和死亡的重要原因。因此，建立合适的糖尿病动物模型，阐明糖尿病及其并发症的发病机制就显得尤为重要。目前糖尿病动物模型的制备方法主要有:手术切除胰腺、化学药物诱导、自发性糖尿病动物模型、转基因动物等

一、动物细胞培养的基本概念细胞培养是通过无菌操作将细胞从动物体内分离出来，置于模拟动物体内生理条件的人工环境中，进行体外培养，使其继续生长的过程。通过这项技术，人们可以观察细胞生长、繁殖、细胞分化和细胞衰老等生命现象。动物培养物的培养物可以是单个细胞或一组细胞。二、动物细胞培养和分型根据体外培养的细

Masson三色法步骤1．石蜡切片脱蜡至水。2． 铬化处理或去汞盐沉淀（甲醛固定的组织此步可略）。3． 依次自来水和蒸馏水洗。4． 用Regaud苏木精染液或Weigert苏木精液染核5-10min。5． 充分水洗,如过染可盐酸酒精分化。6． 蒸馏水洗。7． 用Masson丽春红酸性复红液5-10min。8． 以2%冰醋酸水溶液浸洗片刻。9． 1

小鼠成纤维细胞从小鼠皮肤组织的粘附细胞中分离。成纤维细胞是疏松结缔组织的主要细胞成分，由胚胎间充质细胞分化而来。活跃的细胞被称为成纤维细胞。成纤维细胞体积大，界限分明，多为梭形或星形扁平结构，细胞核规则椭圆形，核仁大而明显。纤维细胞是结缔组织中数量最多的细胞，相对静止的细胞称为纤维细胞。成纤维细胞数

DIO，饮食诱导性肥胖(DIO)是当前研究的热点。西方饮食模式之一的DI0模式，主要以高热量、高脂肪为主。建立这样一个模型似乎很简单。然而，模型失败的情况并不少见。比如有研究人员发现，动物喂养的动物在自己制作肥胖模型饲料后，越来越瘦，而不是越来越胖。在这里，我们来谈谈如何复制肥胖模型，以及需要注意什么。一、肥胖

一、试剂耗材:小鼠(8-10周龄)、玻璃皿(用于解剖小鼠)、培养皿(塑料、DC在光滑皿中可转化良好，所以最好使用一次性塑料培养皿)、剪刀、镊子、纱布、细胞培养液、GKN缓冲液、吸管、离心管(50ml，饭盒中多100ml)、锡箔纸、1ml注射器。二、实验步骤:1.将小鼠的四肢切除(最后两肢最好)，分离附着在骨骼上的肌肉、血管和皮肤(用纱