实验原理细胞划痕法是测定细胞迁移运动与修复能力的常用方法，类似体外伤口愈合模型，故又称伤口愈合法。在体外将细胞培养在培养皿或平板上，当细胞长到融合成单层状态时，用微量枪头或其他硬物在细胞生长的中央区域划线，去除中央部分的细胞，在融合的单层细胞上人为制造一个空白区域，称为"划痕"。然后继续培养

外泌体是由活细胞分泌的一种脂质囊泡，直径大约为30~150纳米，它一般存在于细胞培养上清液、血清、血浆、唾液、尿液、羊水以及其它生物体液中；外泌体能携带多种蛋白质、脂类、RNA等重要信息，在细胞与细胞间的物质和信息传递中起重要作用。通俗的解释，外泌体作为一种活细胞分泌的亚细胞成分，外泌体广泛参与细胞之间的交流

一、获取细胞裂解液冷PBS清洗培养皿或培养瓶中的细胞两次加入冷PBS后用细胞刮将细胞刮下来，收集至eppendoff管1500rpm，4℃离心5min，弃上清，收集细胞用与细胞等体积的RIP裂解液重悬细胞，吹打均匀后于冰上静置5min每管分装200μl细胞裂解液，贮存于-80℃二、制备磁珠-抗体重悬磁珠标记实验所需的eppendoff管吸取50μl 重悬

内参蛋白是用来确保蛋白上样量一致性，量化目的蛋白的表达情况，是免疫印迹（WB）和免疫荧光（IF）等实验结果定量分析或定性比较的重要标尺。怎么选择内参蛋白？内参蛋白主要是一些持家基因，这些持家基因执行大量的基本功能，并持续在多种组织和细胞中高水平表达。 常见内参蛋白包括 Actin、Tubulin、GAPDH、Histone H3 等

正常来说原代细胞分离的方法有很多种：原代细胞是直接取自活组织(例如活组织检查材料)的细胞，并建立用于体外生长。这些细胞经历了非常少的群体倍增，因此与连续(肿瘤或人工永生化)细胞系相比，它们更能代表它们所衍生组织的主要功能成分，使得原代细胞成为更具代表性的体内模型。所以，自己动手分离原代细胞，是非常有必要

活细胞就是可以进行新陈代谢、繁殖、复制的细胞。比如说血小板，筛管细胞，酵母菌，花粉等。死细胞就是不能进行新陈代谢、繁殖、复制的细胞。例如植物的导管细胞。木纤维等。细胞的产物分初级代谢产物和次级代谢产物。包括代谢废物和激素，或者氧气(光合作用细胞的产物）。例如胃蛋白酶，甲状腺素，抗体等。区分死细胞和活细