一、原理 培养的细胞在一般条件下要求有一定的密度才能生长良好，所以要进行细胞计数。计数结果以每毫升细胞数表示。细胞计数的原理和方法与血细胞计数相同。在细胞群体中总有一些因各种原因而死亡的细胞，总细胞中活细胞所占的百分比叫做细胞活力，由组织中分离细胞一般也要检查活力，以了解分离的过程

1、染色过强 原因 解决办法 抗体的浓度过高或抗体孵育时间过长 降低抗体滴度（一般指浓缩性抗体）抗体孵育时间：室温1 小时或4℃过夜 孵育温度过高，孵育温度超过37℃ 一般室温20-28℃ DAB 显色时间过长或 DAB 浓度过高 显色时间不能超过5-10分钟，以显微镜下观察为准2、非特异性背景染色 原因 解决办法 操作过程中冲

材料： 6孔板 marker笔 直尺 20微升枪头（灭菌） 无血清培养基 PBS准备： 所有能灭菌的器械都要灭菌，直尺和marker笔在操作前紫外照射30min（超净台内）流

众所周知，细胞增殖检测方法很多种，比如MTT、CCK8、EdU…等等一大堆，但是这么多的细胞增殖检测方法，怎么选呢？与传统的免疫荧光染色(BrdU)检测方法相比，EdU只有BrdU抗体大小的1/500，在细胞内更容易扩散，不需要严格的样品变性(酸解、热解、酶解)处理，所以，这种方法不需要繁杂的操作，节约时间，且反应更灵敏和准确。

初代培养或原代培养，是从供体获取组织后的培养。组织和细胞刚刚离体，生物性状尚未发生很大的变化，具有二倍体遗传性状，在供体来源充分、生物条件稳定的情况下（年龄、性别），在一定程度上能反映体内状态。实验方法原理消化培养法合成培养基胰蛋白酶消化培养法，能把组织块分散成细

靶向代谢组学（Targeted Metabolomics）是代谢组学研究的重要组成部分，也是全代谢组研究的延伸与拓展。相对于全代谢组分析而言，靶向代谢组分析具有特异性强，检测灵敏度高和定量准确等几个特点。通过对血液、尿液或其他体液以及组织中某一特定的代谢物的富集与准确定量定性分析，一方面可以结合其它实验数据揭示相关的分子