一、原理活细胞的胞浆内含有LDH。正常情况下，LDH不能透过细胞膜，当细胞受到NK细胞的杀伤后，LDH释放到细胞外。LDH 可使乳酸锂脱氢，进而使NAD还原成NADH，后者再经递氢体吩嗪二甲酯硫酸盐（PMS）还原碘硝基氯化四氮唑（INT），INT 接受H＋被还原成紫红色甲月赞类化合物。在酶标仪上用490nm比色测定。二、仪器和材料酶标仪

当在生长培养基中进行单悬浮细胞培养时，样本中出现细胞丢失的情况并不少见。当细胞破裂时，它们会释放DNA和碎片，导致细胞聚集成大团块，使其难以扩张。细胞聚团既可导致细胞凋亡，也可引起细胞死亡。随着更多的细胞死亡并释放碎片，问题将继续恶化。尽可能快地处理或避免细胞聚团将有利于实验的后续结果。为什么细胞聚团是

冻存细胞的错误时机主要有：细胞量太少，细胞状态不好，细胞变形严重，或者细胞生长堆积，一旦生长过平顶期，培养基就会变得很黄，细胞可疑污染；镜下观察细胞有很多碎片或者不明物；培养时间过长，连续培养超过二个月，细胞性状已有改变。解决方法：选择细胞冻存的最佳时机：细胞增殖旺盛，情况稳定，试验效果良好，复苏后

原理：Annexin V 属于 Ca2+ 结合蛋白家族，可与磷脂（PL）发生可逆的Ca2+ 依赖性结合。在健康细胞中，磷脂酰丝氨酸（PS）主要位于质膜的胞质侧，当细胞凋亡开始时，PS 从质膜内部转移至外部，而 Annexin V 对 PS 具有高亲和力，可与暴露在外部细胞环境的 PS 结合。7-AAD（7-氨基-放线菌素D）具有高 DNA 结合常数，并且被完整

前面讲到利用流式细胞术进行细胞凋亡检测的annexinV/PI双染色法，今天主要简要介绍SYTO/PI双染色法、细胞DNA含量分析法、TUNEL法。SYTO/PI双染色法SYTO系列染料是一种细胞膜通透性的核酸染料，可以自由进入活细胞与细胞内的DNA或者RNA结合，未结合时发射荧光信号的能力很弱，与核酸结合后发射荧光信号的能力大幅度升高。根据

腹腔注射是大家最常用的小鼠给药方式，但不少同学在刚开始因为没有掌握注射技巧，常常会遇到液体流出或者内脏出血，导致实验越来越糟糕。那么在小鼠给药及采血时到底需掌握哪些注射手法和技巧呢？一、小鼠腹腔注射1. 小鼠腹腔注射可以用 1ml 的注射器，配合 4 号针头。2. 腹腔注射时右手持注射器，左手的小指和无名指抓住小