当在生长培养基中进行单悬浮细胞培养时，样本中出现细胞丢失的情况并不少见。当细胞破裂时，它们会释放DNA和碎片，导致细胞聚集成大团块，使其难以扩张。细胞聚团既可导致细胞凋亡，也可引起细胞死亡。随着更多的细胞死亡并释放碎片，问题将继续恶化。尽可能快地处理或避免细胞聚团将有利于实验的后续结果。为什么细胞聚团是

冻存细胞的错误时机主要有：细胞量太少，细胞状态不好，细胞变形严重，或者细胞生长堆积，一旦生长过平顶期，培养基就会变得很黄，细胞可疑污染；镜下观察细胞有很多碎片或者不明物；培养时间过长，连续培养超过二个月，细胞性状已有改变。解决方法：选择细胞冻存的最佳时机：细胞增殖旺盛，情况稳定，试验效果良好，复苏后

原理：Annexin V 属于 Ca2+ 结合蛋白家族，可与磷脂（PL）发生可逆的Ca2+ 依赖性结合。在健康细胞中，磷脂酰丝氨酸（PS）主要位于质膜的胞质侧，当细胞凋亡开始时，PS 从质膜内部转移至外部，而 Annexin V 对 PS 具有高亲和力，可与暴露在外部细胞环境的 PS 结合。7-AAD（7-氨基-放线菌素D）具有高 DNA 结合常数，并且被完整

前面讲到利用流式细胞术进行细胞凋亡检测的annexinV/PI双染色法，今天主要简要介绍SYTO/PI双染色法、细胞DNA含量分析法、TUNEL法。SYTO/PI双染色法SYTO系列染料是一种细胞膜通透性的核酸染料，可以自由进入活细胞与细胞内的DNA或者RNA结合，未结合时发射荧光信号的能力很弱，与核酸结合后发射荧光信号的能力大幅度升高。根据

腹腔注射是大家最常用的小鼠给药方式，但不少同学在刚开始因为没有掌握注射技巧，常常会遇到液体流出或者内脏出血，导致实验越来越糟糕。那么在小鼠给药及采血时到底需掌握哪些注射手法和技巧呢？一、小鼠腹腔注射1. 小鼠腹腔注射可以用 1ml 的注射器，配合 4 号针头。2. 腹腔注射时右手持注射器，左手的小指和无名指抓住小

摘要小鼠尸检的主要目的是通过肉眼观察确定基因工程小鼠或患病小鼠的解剖特征，并描述导致发病率和死亡率的病变。为后续检查采集的组织需要适当处理和保存，以防止变质。因此，高效的常规操作对于促进组织学和确保高质量的样本至关重要。此外，优化技术最大限度地减少了损坏样本的数据丢失，减少了使用的动物数量，并支持3R