当我们需要运输或者长，期不用某种细胞时，通常会使用冻存的方法来保存。若未做好细胞冻存，还会直接影响后续细胞复苏状态，所以细胞冻存的重要性不容小觑。本期细胞学堂将带来贴壁细胞和悬浮细胞的冻存操作步骤及注意事项，以便大家查漏补缺。在进行冻存操作，可预先配置好冻存液；若使用无血清非程序冻存液，则无需自己配

细胞培养物来源于原代外植体或分散的细胞悬液。通常在这样的培养物中原代细胞增殖形成汇合地单层细胞或密集地细胞悬液。这类细胞生命周期有限，在有限的生命周期内需掌握好细胞的生长空间，以保持细胞群中基因型和表型的一致性。细胞系是不断生长，分化的细胞群，因其经过遗传改造，致使其具有无限增长的潜能。体外生长的细

1. 需要长势良好的细胞、trizol、PBS缓冲液、三氯甲烷、异丙醇、无水乙醇、无RNA酶水或者DEPC水。2. RNA提取怕的就是被RNA酶给降解了，所以要戴好口罩，操作台面干净卫生。3. 细胞用PBS洗干净，洗净细胞碎片，细胞外泌物等，加trizol试剂，裂解细胞，后收集到离心管中，加入五分体积的三氯甲烷，混匀后室温静置10分钟左右，

由于大多数细胞适宜pH为7.2-7.4，偏离此范围可能对细胞生长将产生有害的影响。但各种细胞对pH的要求也不完,全相同，原代培养细胞一般对pH变动耐受差，无限细胞系耐受力强。但总体来说，细胞耐酸性比耐碱性强一些。在配制培养用液时，需要注意一点：培新配的培养基在经过0.10um或0.22um滤膜过滤时，溶液的pH还会向上浮动0.2左

细胞生物学研究中，为了更好而长，期地研究细胞生物学功能，需要将良好状态的细胞保存起来，以备将来使用。在不附加任何保护剂下直接冻存细胞时，细胞内和外环境中的水都会形成冰晶，能导致细胞内发生机械损伤、电解质升高、渗透压改变、脱水、PH改变、蛋白变性等，能引起细胞死亡。如向培养液加入保护剂，可使冰点降低。在

细菌的结构包括基本结构（细胞壁、细菌膜、细胞质和核质等，为所有细菌都具有的结构）和特殊结构两部分。细胞壁的主要功能：①维持菌体固有形态并起保护作用；②与细胞膜共同完成菌体内外的物质交换；③细胞壁上的抗原决定簇，决定着菌体的抗原性；④细胞壁是鞭毛运动的支点。细胞膜的主要功能：①物质转运；②生物合成；③