回顾前面3种lncRNA发挥功能的方式，我们可以发现lncRNA主要扮演一个间接促进者的作用，通过与功能蛋白结合，增强功能蛋白对下游靶蛋白的调控。而最后，我们来看看lncRNA是如何直接调控靶蛋白的表达。这篇范文2020发表于大家所熟知的nature communication，虽然该杂志一直有些争议，但是我们还是可以默默地感受一下贫富差距。

一、原理 培养的细胞在一般条件下要求有一定的密度才能生长良好，所以要进行细胞计数。计数结果以每毫升细胞数表示。细胞计数的原理和方法与血细胞计数相同。在细胞群体中总有一些因各种原因而死亡的细胞，总细胞中活细胞所占的百分比叫做细胞活力，由组织中分离细胞一般也要检查活力，以了解分离的过程

1、染色过强 原因 解决办法 抗体的浓度过高或抗体孵育时间过长 降低抗体滴度（一般指浓缩性抗体）抗体孵育时间：室温1 小时或4℃过夜 孵育温度过高，孵育温度超过37℃ 一般室温20-28℃ DAB 显色时间过长或 DAB 浓度过高 显色时间不能超过5-10分钟，以显微镜下观察为准2、非特异性背景染色 原因 解决办法 操作过程中冲

材料： 6孔板 marker笔 直尺 20微升枪头（灭菌） 无血清培养基 PBS准备： 所有能灭菌的器械都要灭菌，直尺和marker笔在操作前紫外照射30min（超净台内）流

众所周知，细胞增殖检测方法很多种，比如MTT、CCK8、EdU…等等一大堆，但是这么多的细胞增殖检测方法，怎么选呢？与传统的免疫荧光染色(BrdU)检测方法相比，EdU只有BrdU抗体大小的1/500，在细胞内更容易扩散，不需要严格的样品变性(酸解、热解、酶解)处理，所以，这种方法不需要繁杂的操作，节约时间，且反应更灵敏和准确。

初代培养或原代培养，是从供体获取组织后的培养。组织和细胞刚刚离体，生物性状尚未发生很大的变化，具有二倍体遗传性状，在供体来源充分、生物条件稳定的情况下（年龄、性别），在一定程度上能反映体内状态。实验方法原理消化培养法合成培养基胰蛋白酶消化培养法，能把组织块分散成细